دراسة علمية في قسم علوم الحياة بكلية العلوم أعدها طالب الماجستير محمد فوزي شعلان من اعتماد مستخلص بذور الفاصوليا المنبتة لمعالجة الإصابة بالحروق من خلال استخدام إنزيم البروتيز الحر والمفيد على شاش القطن وعلاج الحروق المحدثة في الحيوانات المختبرية قياسا بالعلاج التجاري (Flamazine) حيث دلت النتائج ان مدة شفاء الحروق المعالجة بانزيم البروتيز بشكيلة الحر والمقيد كانت اقل من مدة شفاء الحرق المعالجة بمرهم(Flamazine) . بأشراف الاستاذ الدكتور محمد عبد الله جبر التدريسي في قسم علوم الحياة .
تم فيها التحري عن فعالية انزيم البروتيز في البذور المنبتة لثمانية أنواع من النباتات ( ألماش- بذور البزاليا- بذور الفاصوليا البيضاء – بذور اللوبيا- بذور الحمص و بذور العدس-بذور الباقلاء- بذور القمح- بذور الشعير) وأظهرت النتائج امتلاك مستخلص بذور الفاصوليا المنبتة Phaseolus Vulgaris L مستوى عال من إنزيم البروتيز لما اثبته من فعالية أنزيميه عالية وعلية اختير مصدرا لدراسة الإنزيم اذ تم تعيين أفضل مدة إنبات والظروف المثلى لاستخلاص الإنزيم من بذور الفاصوليا المنبتة باستخدام محاليل ودوارى ذات تراكيز وأرقام هيدروجينية مختلفة وكانت أفضل مدة إنبات 6 أيام اذ سجل الإنزيم فعالية أنزيميه بلغت 9.5 وحدة/مليلتر فيما كان أفضل محلول دارىء هو فوسفات الصوديوم بتركيز 0.2 مولار وبرقم هيدروجيني 6 فقد سجل الإنزيم فعالية إنزيمية بلغت 9.3 وحده / مليلتر وان أفضل نسبة استخلاص هي 3:1 ( وزن: حجم) قياسا بسبته الاستخلاص الاخرى (7:1,5:1,1:1( حيث أعطى الإنزيم فعالية إنزيمية مقدارها 9.1 وحدة/ مليلتر وبينت الدراسة ايضا ان إضافة الستائين Cysteine والاثلين ثنائي امين ثلاثي حامض الخليك EDTA بتركيز 1 ملي مولار الى دارىء له أهمية في الحفاظ على ثبات الإنزيم .وعملنا الدراسة على تقنية إنزيم البروتيز بعده خطوات شملت الترسيب بكبريتات الامونيوم 90%-70% وكروماتوككرافيا التبادل الايوني باستخدام المبادل الايوني ثنائي اثيل امينو اثيل سيليلوز DEAE-Cellulose والترشيح الهلامي على هلام السيفاكريل Sepphacryl S-200 واظهرت النتائج وجود صورتين إنزيميتين (C,A) لانزيم البروتيز وبلغ عدد مرات التقنية ( 88.49.4.09 ) وبحصيلة إنزيمية (22.58.8.352 ) % لصورتي الانزيم (C,A) على التوالي.وقد فحصت الدراسة نقاوة الانزيم بطرقة الترحيل الكهربائي في هلام متعدد الاكريل امايد تحت ظروف غير ماسخة فيما قدر الوزن الجزيئي للانزيم بطريقه الترحيل الكهربائي في هلام متعدد الاكريل امايد تحت ظروف ماسخة )SDS-PAGE) فكان 32.359 كليودالتون اما الوزن الجزيئي للانزيم المقدر بطريقة الترشيح الهلامي فكان 33.884 كليو دالتون. حيث أوضحت نتائج الدراسة تاثير بعض المركبات الكيميائية في فعالية الانزيم بان الانزيم قد احتفظ بكامل فعاليته تقريبا عند حضنه مع 5 و10 ملي مولار من EDTA و PMSF مما يدل على انه ليس من البروتيزات المعدنية او السيرينية في حين ازدادت فعالية الإنزيم عند حضنه مع 5 و10 ملي مولار من 2-mercaptoethanol لتبلغ 175% و 221% على التوالي وازدادت الفعالية المتبقية بنسب مختلفه للإنزيم عند حضنه مع 5 و10 ملي مولار من كلوريدات الصوديوم والكالسيوم والمنغنيز وثبطت فعالية الانزيم عند حضنه مع 5 و10 ملي ممولار من كلوريد الزئبق اذ بلغت الفعالية المتبقية للإنزيم 21.2 و 13.7 % على التولي .وبينت الدراسة امكانية تقيد الانزيم المنقى من بذور الفاصوليا المنبته باستعمال الجينات الكالسيوم بطريقه الاقتناص وشاش القطن بطريقه الربط التساهمي اذ كانت نسبة التقييد 85% و78% على التوالي.
تم فيها التحري عن فعالية انزيم البروتيز في البذور المنبتة لثمانية أنواع من النباتات ( ألماش- بذور البزاليا- بذور الفاصوليا البيضاء – بذور اللوبيا- بذور الحمص و بذور العدس-بذور الباقلاء- بذور القمح- بذور الشعير) وأظهرت النتائج امتلاك مستخلص بذور الفاصوليا المنبتة Phaseolus Vulgaris L مستوى عال من إنزيم البروتيز لما اثبته من فعالية أنزيميه عالية وعلية اختير مصدرا لدراسة الإنزيم اذ تم تعيين أفضل مدة إنبات والظروف المثلى لاستخلاص الإنزيم من بذور الفاصوليا المنبتة باستخدام محاليل ودوارى ذات تراكيز وأرقام هيدروجينية مختلفة وكانت أفضل مدة إنبات 6 أيام اذ سجل الإنزيم فعالية أنزيميه بلغت 9.5 وحدة/مليلتر فيما كان أفضل محلول دارىء هو فوسفات الصوديوم بتركيز 0.2 مولار وبرقم هيدروجيني 6 فقد سجل الإنزيم فعالية إنزيمية بلغت 9.3 وحده / مليلتر وان أفضل نسبة استخلاص هي 3:1 ( وزن: حجم) قياسا بسبته الاستخلاص الاخرى (7:1,5:1,1:1( حيث أعطى الإنزيم فعالية إنزيمية مقدارها 9.1 وحدة/ مليلتر وبينت الدراسة ايضا ان إضافة الستائين Cysteine والاثلين ثنائي امين ثلاثي حامض الخليك EDTA بتركيز 1 ملي مولار الى دارىء له أهمية في الحفاظ على ثبات الإنزيم .وعملنا الدراسة على تقنية إنزيم البروتيز بعده خطوات شملت الترسيب بكبريتات الامونيوم 90%-70% وكروماتوككرافيا التبادل الايوني باستخدام المبادل الايوني ثنائي اثيل امينو اثيل سيليلوز DEAE-Cellulose والترشيح الهلامي على هلام السيفاكريل Sepphacryl S-200 واظهرت النتائج وجود صورتين إنزيميتين (C,A) لانزيم البروتيز وبلغ عدد مرات التقنية ( 88.49.4.09 ) وبحصيلة إنزيمية (22.58.8.352 ) % لصورتي الانزيم (C,A) على التوالي.وقد فحصت الدراسة نقاوة الانزيم بطرقة الترحيل الكهربائي في هلام متعدد الاكريل امايد تحت ظروف غير ماسخة فيما قدر الوزن الجزيئي للانزيم بطريقه الترحيل الكهربائي في هلام متعدد الاكريل امايد تحت ظروف ماسخة )SDS-PAGE) فكان 32.359 كليودالتون اما الوزن الجزيئي للانزيم المقدر بطريقة الترشيح الهلامي فكان 33.884 كليو دالتون. حيث أوضحت نتائج الدراسة تاثير بعض المركبات الكيميائية في فعالية الانزيم بان الانزيم قد احتفظ بكامل فعاليته تقريبا عند حضنه مع 5 و10 ملي مولار من EDTA و PMSF مما يدل على انه ليس من البروتيزات المعدنية او السيرينية في حين ازدادت فعالية الإنزيم عند حضنه مع 5 و10 ملي مولار من 2-mercaptoethanol لتبلغ 175% و 221% على التوالي وازدادت الفعالية المتبقية بنسب مختلفه للإنزيم عند حضنه مع 5 و10 ملي مولار من كلوريدات الصوديوم والكالسيوم والمنغنيز وثبطت فعالية الانزيم عند حضنه مع 5 و10 ملي ممولار من كلوريد الزئبق اذ بلغت الفعالية المتبقية للإنزيم 21.2 و 13.7 % على التولي .وبينت الدراسة امكانية تقيد الانزيم المنقى من بذور الفاصوليا المنبته باستعمال الجينات الكالسيوم بطريقه الاقتناص وشاش القطن بطريقه الربط التساهمي اذ كانت نسبة التقييد 85% و78% على التوالي.
