نوقش في قسم علوم الحياة سمنار ماقبل الكتابة لطالبة الدكتوراه فادية حميد فرع النبات بعنوان ( التأثيرات العلاجية لعقار نبات الحامول Cuscuta chinesis Lam للسيطرة على مرض السكري في الجرذان البيض على المستوى الجزيئي ) وعلى قاعة الدراسات العليا في القسم . هدفت الدراسة الحالية الى تشخيص المركبات الفعالة وتقييم الفعالية المضادة للأكسدة في المستخلص الميثانولي المائي لنبات الحامول ،وتحديد ميكانيكية الفعل لهذا المستخلص في علاج داء السكري النوع الاول في الجرذان على المستوى الجزيئي اضافة الى التحقق من كونه علاجا امنا من خلال دراسة تأثير هذا المستخلص على بعض المؤشرات السمية الخلوية .ولذا تطلب انجاز هذه الدراسة تقسيم 54 ذكرا من الجرذان نوع Rattus rattus والتي كانت تتراوح معدلات اوزانهم ((180 -200 غم الى ثلاث مجاميع رئيسية : مجموعةA (مجموعة السيطرة للجرذان الطبيعي والتي تم تجريعها بالماء المقطر يومياً)، مجموعة B(مجموعة السيطرة للجرذان المصابة بداء السكري النوع الاول والتي تم تجريعها ايضاً بالماء المقطر يومياً )اما المجموعة الثالثة C فكانت (مجموعة الجرذان المصابة بداء السكري النوع الاول والتي تم تجريعها يومياً بالمستخلص الميثانولي بمقدار 400 ملغم / كغم من وزن الجسم ).
تم تقسم كل مجموعة رئيسية والتي كانت تتالف من 18 جرذا الى ثلاث مجاميع ثانوية وفقا لمدة التجريع : مجوعة رقم 1، مجموعة رقم 2 ومجموعة رقم 3 لتشير الى عدد أيام التجريع 30 ، 60 و 90 يوما على التوالي.ولاستحداث مرض السكري النوع الاول في الجرذان تم حقن الجرذان ثلاث جرعات( بواقع جرعة كل 48 ساعة) بمادة الالوكسان 180 ملغم /كغم داخل غشاء البريتون. تضمنت هذه الدراسة العديد من الفحوصات والتي اوضحت النتائج التالية: وجود جميع المركبات الفعالة التي تم الكشف عنها بالكشوفات التمهيدية الاستدلالية والتي شملت القلويدات ، الفينولات ، الفلافونات ، التانينات ، الكومارينات ، الكلايكوسيدات ، الصابونين، الراتنجات ، الكاربوهيدرات ، التربينات والزيوت الاساسية. اما بالنسبة لنتائج تحليل الكروماتوكرافيا السائلة عالية الاداء ( HPLC) فقد اكدت وجود كل من البربرين ،الكامفيرول ، الكورستين والبيتاكاروتين بتركيز( 246 ، 13.3، 320 و 17977 ) على التوالي. واكدت نتائج تحليل الكروماتوكرافيا الغازية – الكتلة وجود 14 مركبا فعالا. اظهرت نتائج اختبار الفعالية المضادة للاكسدة من خلال كروماتوكرافيا الطبقة الرقيقة وجود العديد من المركبات النباتية الكيميائية المضادة للاكسدة والتي تمثلت بالحزم المحتفضة باللون الاصفر بعد رش صفائح السيليكا بمادة البيتاكاروتين. اظهرت نتائج فحص وزن الجسم انخفاضا معنويا (p< 0.05) في اوزان جرذان مجاميع السكري السيطرة قياسا بمجاميع السيطرة الطبيعية ، كما واظهرت ارتفاعا معنويا (p< 0.05) في اوزان جرذان مجاميع السكري المجرعة بمستخلص الحامول والذي ازداد بزيادة مدة التجريع قياسا بمجاميع السكري السيطرة . بينت نتائج فحص مستويات كلوكوز الدم الصيامي وجود ارتفاعا معنويا (p< 0.05) في مستويات كلوكوز الدم الصيامي في جرذان مجاميع السكري السيطرة والتي ازدادت بزيادة مدة التجربة قياسا بمجاميع السيطرة الطبيعية، كما واظهرت انخفاضا معنويا (p< 0.05) في مستويات كلوكوز الدم الصيامي في جرذان مجاميع السكري المجرعة بمستخلص الحامول والذي استمر بالانخفاض وبشكل معنوي بزيادة مدة التجريع قياسا بمجاميع السكري السيطرة .
بينت نتائج فحص مستويات انسولين المصل الصيامي وجود انخفاضا معنويا (p< 0.05) في مستويات انسولين المصل الصيامي في جرذان مجاميع السكري السيطرة ة قياسا بمجاميع السيطرة الطبيعية العائدة للفترة ذاتها من التجربة ، كما واظهرت النتائج الارتفاع المعنوي (p< 0.05) في مستويات انسولين المصل الصيامي في جرذان مجاميع السكري المجرعة بمستخلص الحامول قياسا بمجاميع السكري السيطرة العائدة للفترة ذاتها من التجربة . اظهرت نتائج الدراسة على المستوى الجزيئي وجود فروق معنوية(p< 0.05) في مستوى التعبير الجيني لجين الانسولين 1 في خلايا البنكرياس بين المجاميع المختلفة والتي تمثلت بالارتفاع المعنوي في مجموعة السكري المجرعة والانخفاض المعنوي لمجموعة السكري السيطرة قياسا بالمستوى الطبيعي في مجموعة السيطرة الطبيعية ، في حين لم يكن لاختلاف الفترة الزمنية تاثير معنوي في تغيير مستوى التعبير الجيني الخاص بكل مجموعة من مجموعات التجربة باستثاء الانخفاض المعنوي في مجموعة السكري السيطرة خلال الفترة 60 يوم قياسا بالفترة 30 يوم ، أما بالنسبة لمستوى التعبير الجيني لجين الانسولين 1 في خلايا الكبد فنلاحظ ارتفاع غير معنوي لمستوى التعبير الجيني لجين الانسولين 1 في خلايا الكبد العائدة لمجموعة السكري السيطرة قياسا بمجموعة السيطرة الطبيعية خلال جميع فترات الدراسة ،كماو نلاحض فعالية مستخلص الحامول في رفع مستوى التعبير الجيني لجين الانسولين 1 بشكل معنوي(p< 0.05) في خلايا كبد الجرذان العائدة لمجموعة السكري المجرعة قياسا بمجموعتي السكري السيطرة والسيطرة الطبيعية وقد استمرت هذه الزيادة وبشكل معنوي بزيادة مدة التجريع . كما اظهرت النتائج انخفاضا معنويا لمستوى التعبير الجيني لجين مستقبل الانسولين في خلايا الكبد لمجموعة السكري السيطرة خلال الفترات 60 و 90 يوما قياسا بالمجاميع الاخرى ، في حين ارتفع مستوى التعبير الجيني لجين مستقبل الانسولين بشكل معنوي(p< 0.05) في خلايا كبد الجرذان العائدة لمجموعة السكري المجرعة قياسا بمجموعتي السكري السيطرة والسيطرة الطبيعية والتي ازدادت وبشكل معنوي بزيادة مدة التجريع. بينت المقاطع النسيجية لبنكرياس مجموعة السكري السيطرة نقصا حادا في عدد الخلايا البائية (جزيرات لانكرهانس) ، كما واظهرت ايضا وجود تنكس وتفجي في السايتوبلازم، وارتشاح الخلايا الالتهابية ، واحتقان وعائي في جزء الافراز الخارجي للبنكرياس ، على العكس من مجموعة السكري المجرعة والتي اظهرت زيادة واضحة في عدد الخلايا البائية (جزيرات لانكرهانس) والتي استمرت بالزيادة بزيادة مدة التجريع كما وظهر كل من السايتوبلازم واجزاء الافراز الخارجي للبنكرياس بمظهرا طبيعيا في هذه المجموعة . اظهرت نتائج الدراسة السمية حصول زيادة معنوية في كل من GOT ، GPT ، Caspase9 وCaspase3 في مصل جرذان مجموعة السكري السيطرة قياسا بكل من مجموعتي السكري.
تم تقسم كل مجموعة رئيسية والتي كانت تتالف من 18 جرذا الى ثلاث مجاميع ثانوية وفقا لمدة التجريع : مجوعة رقم 1، مجموعة رقم 2 ومجموعة رقم 3 لتشير الى عدد أيام التجريع 30 ، 60 و 90 يوما على التوالي.ولاستحداث مرض السكري النوع الاول في الجرذان تم حقن الجرذان ثلاث جرعات( بواقع جرعة كل 48 ساعة) بمادة الالوكسان 180 ملغم /كغم داخل غشاء البريتون. تضمنت هذه الدراسة العديد من الفحوصات والتي اوضحت النتائج التالية: وجود جميع المركبات الفعالة التي تم الكشف عنها بالكشوفات التمهيدية الاستدلالية والتي شملت القلويدات ، الفينولات ، الفلافونات ، التانينات ، الكومارينات ، الكلايكوسيدات ، الصابونين، الراتنجات ، الكاربوهيدرات ، التربينات والزيوت الاساسية. اما بالنسبة لنتائج تحليل الكروماتوكرافيا السائلة عالية الاداء ( HPLC) فقد اكدت وجود كل من البربرين ،الكامفيرول ، الكورستين والبيتاكاروتين بتركيز( 246 ، 13.3، 320 و 17977 ) على التوالي. واكدت نتائج تحليل الكروماتوكرافيا الغازية – الكتلة وجود 14 مركبا فعالا. اظهرت نتائج اختبار الفعالية المضادة للاكسدة من خلال كروماتوكرافيا الطبقة الرقيقة وجود العديد من المركبات النباتية الكيميائية المضادة للاكسدة والتي تمثلت بالحزم المحتفضة باللون الاصفر بعد رش صفائح السيليكا بمادة البيتاكاروتين. اظهرت نتائج فحص وزن الجسم انخفاضا معنويا (p< 0.05) في اوزان جرذان مجاميع السكري السيطرة قياسا بمجاميع السيطرة الطبيعية ، كما واظهرت ارتفاعا معنويا (p< 0.05) في اوزان جرذان مجاميع السكري المجرعة بمستخلص الحامول والذي ازداد بزيادة مدة التجريع قياسا بمجاميع السكري السيطرة . بينت نتائج فحص مستويات كلوكوز الدم الصيامي وجود ارتفاعا معنويا (p< 0.05) في مستويات كلوكوز الدم الصيامي في جرذان مجاميع السكري السيطرة والتي ازدادت بزيادة مدة التجربة قياسا بمجاميع السيطرة الطبيعية، كما واظهرت انخفاضا معنويا (p< 0.05) في مستويات كلوكوز الدم الصيامي في جرذان مجاميع السكري المجرعة بمستخلص الحامول والذي استمر بالانخفاض وبشكل معنوي بزيادة مدة التجريع قياسا بمجاميع السكري السيطرة .
بينت نتائج فحص مستويات انسولين المصل الصيامي وجود انخفاضا معنويا (p< 0.05) في مستويات انسولين المصل الصيامي في جرذان مجاميع السكري السيطرة ة قياسا بمجاميع السيطرة الطبيعية العائدة للفترة ذاتها من التجربة ، كما واظهرت النتائج الارتفاع المعنوي (p< 0.05) في مستويات انسولين المصل الصيامي في جرذان مجاميع السكري المجرعة بمستخلص الحامول قياسا بمجاميع السكري السيطرة العائدة للفترة ذاتها من التجربة . اظهرت نتائج الدراسة على المستوى الجزيئي وجود فروق معنوية(p< 0.05) في مستوى التعبير الجيني لجين الانسولين 1 في خلايا البنكرياس بين المجاميع المختلفة والتي تمثلت بالارتفاع المعنوي في مجموعة السكري المجرعة والانخفاض المعنوي لمجموعة السكري السيطرة قياسا بالمستوى الطبيعي في مجموعة السيطرة الطبيعية ، في حين لم يكن لاختلاف الفترة الزمنية تاثير معنوي في تغيير مستوى التعبير الجيني الخاص بكل مجموعة من مجموعات التجربة باستثاء الانخفاض المعنوي في مجموعة السكري السيطرة خلال الفترة 60 يوم قياسا بالفترة 30 يوم ، أما بالنسبة لمستوى التعبير الجيني لجين الانسولين 1 في خلايا الكبد فنلاحظ ارتفاع غير معنوي لمستوى التعبير الجيني لجين الانسولين 1 في خلايا الكبد العائدة لمجموعة السكري السيطرة قياسا بمجموعة السيطرة الطبيعية خلال جميع فترات الدراسة ،كماو نلاحض فعالية مستخلص الحامول في رفع مستوى التعبير الجيني لجين الانسولين 1 بشكل معنوي(p< 0.05) في خلايا كبد الجرذان العائدة لمجموعة السكري المجرعة قياسا بمجموعتي السكري السيطرة والسيطرة الطبيعية وقد استمرت هذه الزيادة وبشكل معنوي بزيادة مدة التجريع . كما اظهرت النتائج انخفاضا معنويا لمستوى التعبير الجيني لجين مستقبل الانسولين في خلايا الكبد لمجموعة السكري السيطرة خلال الفترات 60 و 90 يوما قياسا بالمجاميع الاخرى ، في حين ارتفع مستوى التعبير الجيني لجين مستقبل الانسولين بشكل معنوي(p< 0.05) في خلايا كبد الجرذان العائدة لمجموعة السكري المجرعة قياسا بمجموعتي السكري السيطرة والسيطرة الطبيعية والتي ازدادت وبشكل معنوي بزيادة مدة التجريع. بينت المقاطع النسيجية لبنكرياس مجموعة السكري السيطرة نقصا حادا في عدد الخلايا البائية (جزيرات لانكرهانس) ، كما واظهرت ايضا وجود تنكس وتفجي في السايتوبلازم، وارتشاح الخلايا الالتهابية ، واحتقان وعائي في جزء الافراز الخارجي للبنكرياس ، على العكس من مجموعة السكري المجرعة والتي اظهرت زيادة واضحة في عدد الخلايا البائية (جزيرات لانكرهانس) والتي استمرت بالزيادة بزيادة مدة التجريع كما وظهر كل من السايتوبلازم واجزاء الافراز الخارجي للبنكرياس بمظهرا طبيعيا في هذه المجموعة . اظهرت نتائج الدراسة السمية حصول زيادة معنوية في كل من GOT ، GPT ، Caspase9 وCaspase3 في مصل جرذان مجموعة السكري السيطرة قياسا بكل من مجموعتي السكري.
